光陰荏苒,歲月如梭,做實驗的時光總是過得特別快。轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞篩選,動輒幾個星期,多則數(shù)月,真是急得人直跳腳。MACSelect的登場,讓一切問題都迎刃而解了。
德國美天旎公司推出的MACSelect?系統(tǒng),是一種轉(zhuǎn)染細(xì)胞分選系統(tǒng),可以磁性富集已轉(zhuǎn)染的哺乳動物細(xì)胞。無論是原代細(xì)胞或難轉(zhuǎn)的細(xì)胞系,也不論是貼壁或懸浮細(xì)胞,在常規(guī)轉(zhuǎn)染后都能分選。高比例的陽性細(xì)胞和小的非轉(zhuǎn)染細(xì)胞的背景,增加了下游的分析顯著性和可靠性。
無論你進行功能基因分析、藥篩、報告基因檢測,還是RNAi,轉(zhuǎn)染都是必不可少的步驟。那么,試試MACSelect吧,3小時篩選出轉(zhuǎn)染細(xì)胞,花少的時間獲得大的結(jié)果!
與耗時的***篩選相比,使用MACSelect技術(shù),僅需3小時就能挑選出轉(zhuǎn)染陽性細(xì)胞。重復(fù)的MACSelect挑選,可得到穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系。溫柔的MACS磁珠極小,直徑僅有50 nm,對細(xì)胞無毒性,不影響細(xì)胞功能,還能降解。篩選出的細(xì)胞能直接進行功能研究或細(xì)胞培養(yǎng)。同時,你也無需改變轉(zhuǎn)染方法。只要加入MACSelect的篩選標(biāo)志,任何轉(zhuǎn)染方法:電轉(zhuǎn)、磷酸鈣、脂質(zhì)體或核轉(zhuǎn)染都OK。
MACSelect是一個聰明的系統(tǒng)。選擇標(biāo)志物共表達(dá)在細(xì)胞表面,已轉(zhuǎn)染的細(xì)胞可通過磁性標(biāo)記從未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中分選出來。所有的pMACS載體編碼的表面標(biāo)志物都刪除了胞內(nèi)domain。使用pMACS載體和表達(dá)載體的共轉(zhuǎn)是簡單的 MACSelect系統(tǒng)使用方法。當(dāng)然,也可以把基因克隆到pMACS載體進行單轉(zhuǎn)。
美天旎提供的篩選標(biāo)志有三種:CD4、H2-KK、LNGFR。MACSelect 4 系統(tǒng)使用修改的人CD4分子作為選擇標(biāo)志物。它適用于CD4陰性細(xì)胞系。MACSelect KK系統(tǒng)使用修改的小鼠MHC I分子H-2KK作為選擇標(biāo)志物。僅有極少的鼠系細(xì)胞表達(dá)H-2KK,因而其可用于幾乎任何哺乳動物細(xì)胞。MACSelect LNGFR系統(tǒng)使用的人低親和度神經(jīng)生長因子受體(LNGFR)分子經(jīng)過修改。表達(dá)LNGFR分子的細(xì)胞有:**和外周神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞,骨髓成纖維細(xì)胞,濾泡樹突狀細(xì)胞和一些間充質(zhì)細(xì)胞。因此,載體也有常規(guī)和雙順反子兩類。
幾個小時后,轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞就被MACSelect磁珠標(biāo)記上,并通過磁性作用在MACS的柱上進行分離。如果是手動操作,MS或LS柱加MACS分離器就行,如果是高通量的分析,autoMACS將是個不錯的選擇。
MACSelect的步驟
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